2018年執業藥師考試“常用的分離與精制方法”考點總結


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常用的分離與精制方法
1、根據溶解度差別進行分離
(1)利用溫度不同引起溶解度的改變進行分離:常用結晶與重結晶。
結晶純度的判斷:
形態和色澤:晶形和色澤均勻;
熔點和熔距:熔距1-2℃之間;
色譜分析:不同的系統條件,均為單一斑點;
高效液相;質譜和核磁共振。
(2)利用兩種以上不同溶劑的極性和溶解性差異進行分離
水提醇沉:沉淀蛋白質、多糖;
醇提水沉法:沉淀除去樹脂、葉綠素;
醇-醚/丙酮法:沉淀皂苷。
(3)利用酸堿性進行分離
酸堿沉淀法分離生物堿、黃酮;調節pH值,利用等電點沉淀蛋白質。
(4)沉淀法
酸堿沉淀法:如,生物堿、黃酮;
試劑沉淀法:如,皂苷用丙酮或乙醚沉淀,生物堿雷氏鹽沉淀法等;
酸性化合物:鈣、鋇、鉛鹽等。
2、根據物質在兩相溶劑中的分配比不同進行分離
(1)液-液萃取法:分配系數K不同而達到分離的方法。用分離因子β=KA/KB表示,β越大越易分離。
(2)液-液萃取與紙色譜(PC)
(3)液-液分配柱色譜
正相色譜:固定相的極性大于流動相;分離水溶性和極性較大的化合物(如生物堿、苷類、糖類、有機酸等化合物)時。
反相色譜:固定相的極性小于流動相;分離脂溶性化合物。
3、根據物質的吸附性差別進行分離
(1)物理吸附(表面吸附):
1)極性吸附劑
硅膠:適用分離的化合物范圍廣泛,但不宜分離堿性化合物。
氧化鋁:適于分離堿性成分,不宜分離醛、酮、酯和內酯。
2)非極性吸附劑
活性碳:對非極性物質有較強的親和能力。應用脫色、脫臭。
3)大孔吸附樹脂
原理: 即具有吸附性,又具有篩選性分離的特點。
應用:分離和富集,適于分離水溶性化合物(糖、苷、生物堿等);工業廢水,廢液的凈化處理。
洗脫液的選擇:
水洗:單糖、鞣質、低聚糖、多糖等極性物質;
70%乙醇洗:皂苷,少量酚、糖及黃酮;
3%-5%堿液洗:黃酮、有機酸、酚類和氨基酸;
10%酸洗:生物堿、氨基酸;
丙酮洗:中性親脂性成分。
(2)化學吸附:黃酮等酚酸性物質被堿性氧化鋁吸附,或生物堿被酸性硅膠吸附。
(3)半化學吸附:聚酰胺吸附
原理:聚酰胺中的酰胺基可與酚羥基、羧基、羰基等形成氫鍵吸附。
對聚酰胺柱的洗脫能力:尿素>二甲基甲酰胺>甲酰胺>氫氧化鈉水>丙酮>甲醇、水。應用:分離酚類、黃酮類、脫鞣質。
4、根據物質分子大小差別進行分離
(1)凝膠過濾色譜法
常用的有葡聚糖凝膠(sepHadex G),及羥丙基葡聚糖凝膠(SepHarese LH-20)等。葡聚糖凝膠只適于在水中應用。羥丙基葡聚糖凝膠適于不同類型的有機物的分離。在水中不溶,可膨脹。
分離原理:根據分子量大小,大分子物質首先被洗出。常用透析法除無機鹽。
(2)膜過濾法:以外界能量或化學位差為推動力,對多組分進行分離、分級、提純或富集。主要技術:滲透、反滲透、超濾、電滲析、液膜技術。常用透析法除無機鹽。
5、根據物質的解離程度不同進行分離
(1)離子交換色譜法
適于可離子化的物質的分離。如:氨基酸、生物堿、有機酸和酚類。
陽離子交換樹脂:強酸性:-SO3-H+(分離生物堿)、弱酸性(-COO-H+)。
陰離子交換樹脂:強堿性:-N+(CH3)3CL-(分離有機酸)、弱堿性。
應用:可離子化的成分,分離不同電荷離子,相同電荷的離子;對離子型化合物和非離子型化合物進行分離。
6、根據物質的沸點進行分離
分餾法是利用中藥中各成分(液體)沸點的差別進行提取分離的方法。
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