臨床執業醫師[生物化學]考點:核酸的理化性質
更新時間:2010-08-24 13:15:53
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核酸的理化性質
1、DNA的變性
在某些理化因素作用下,如加熱,DNA分子互補堿基對之間的氫鍵斷裂,使DNA雙螺旋結構松散,變成單鏈,即為變性。監測是否發生變性的一個最常用的指標是DNA在紫外區260nm波長處的吸光值變化。解鏈過程中,吸光值增加,并與解鏈程度有一定的比例關系,稱為DNA的增色效應。紫外光吸收值達到最大值的50%時的溫度稱為DNA的解鏈溫度(Tm),一種DNA分子的Tm值大小與其所含堿基中的G+C比例相關,G+C比例越高,Tm值越高。
2、DNA的復性和雜交
變性DNA在適當條件下,兩條互補鏈可重新恢復天然的雙螺旋構象,這一現象稱為復性,其過程為退火,產生減色效應。不同來源的核酸變性后,合并一起復性,只要這些核苷酸序列可以形成堿基互補配對,就會形成雜化雙鏈,這一過程為雜交。雜交可發生于DNA-DNA之間,RNA-RNA之間以及RNA-DNA之間。
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