2013年自考生物化學復習資料（2）

更新時間：2013-05-03 13:39:05 來源：|0

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　　6、因素影響DNA的復性過程：(1)陽離子可中和DNA分子中磷酸基團的負電荷，減弱DNA鏈間的靜電作用，促進DNA的復性;(2)低于Tm的溫度可以促進DNA復性;(3)DNA鏈濃度增高可以加快互補鏈隨機碰撞的速度和機會，從而促進DNA復性。

　　7、蛋白質中N的平均含量為16%，即lmg蛋白氨相當于6.25mg蛋白質。除甘氨酸外，其他蛋白質氨基酸均為L-型氨基酸。氨基酸的凈電荷為零，這個PH值成為等電點(氨基酸溶劑度最低)。

　　8. 簡述蛋白質變性與沉淀的關系。

　　概念是不同的。沉淀是指在某些因素的影響下，蛋白質從溶液中析出的現象;而變性是指在變性因素的作用下蛋白質的空間結構被破壞，生物活性喪失，理化性質發生改變。變性的蛋白質溶解度明顯降低，易結絮、凝固而沉淀;但是沉淀的蛋白質卻不一定變性，如加熱引起的蛋白質沉淀是由于蛋白質熱變性所致，而硫酸銨鹽析所得蛋白質沉淀一般不會變性。

　　9. 試論蛋白質一級結構與空間結構的關系。

　　①以RNA酶變性與復性實驗、有活性牛胰島素的人工合成為例證實蛋白質一級結構決定其空間結構。②Anfinsen發現蛋白質二硫鍵異構酶(PDI)能加速蛋白質正確二硫鍵的形成;如RNA酶復性的過程是十分緩慢的，有時需要幾個小時，而PDI在體外能幫助變性后的RNA酶在2min內復性。分子伴侶在細胞內能夠幫助新生肽鏈正確組裝成為成熟的蛋白質。由此可見，蛋白質空間結構的形成既決定于其一級結構，也與分子伴侶、蛋白質二硫鍵異構酶等助折疊蛋白的助折疊作用密不可分。

　　10. 概述蛋白質一級結構測定的一般程序。

　　蛋白質一級結構測定的一般程序為：①測定蛋白質(要求純度必須達到97%以上)的相對分子質量和它的氨基酸組成，推測所含氨基酸的大致數目。②測定多肽鏈N-末端和C-末端的氨基酸，從而確定蛋白質分子中多肽鏈的數目。然后通過對二硫鍵的測定，查明蛋白質分子中二硫鍵的有無及數目。如果蛋白質分子中多肽鏈之間含有二硫鍵，則必須拆開二硫鍵，并對不同的多肽鏈進行分離提純。③用裂解點不同的兩種裂解方法(如胰蛋白酶裂解法和溴化氰裂解法)分別將很長的多肽鏈裂解成兩套較短的肽段。④分離提純所產生的肽段，用蛋白質序列儀分別測定它們的氨基酸序列。⑤應用肽段序列重疊法確定各種肽段在多肽鏈中的排列次序，即確定多肽鏈中氨基酸排列順序。⑥如果有二硫鍵，需要確定其在多肽鏈中的位置。

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