臨床檢驗技師復習:熒光偏振免疫測定的原理
更新時間:2013-02-28 09:32:45
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摘要 臨床檢驗技師復習資料:熒光偏振免疫測定的原理
臨床檢驗技師復習資料:熒光偏振免疫測定的原理
熒光物質經單一平面的偏振光藍光(波長485nm)照射后,可吸收光能躍入激發態;在恢復至基態時,釋放能量并發出單一平面的偏振熒光(波長525nm)。偏振熒光的強度與熒光物質受激發時分子轉動的速度成反比。大分子物質旋轉慢,發出的偏振熒光強;小分子物質旋轉快,其偏振熒光弱。利用這一現象建立了熒光偏振免疫測定,用于小分子物質特別是藥物的測定。
FPIA的試劑為熒光素標記的藥物和抗藥物的抗體,模式為均相競爭法,標本中的藥物與熒光標記的藥物與一定量的抗體競爭結合。反應平衡后,與抗體結合的熒光標記藥物的量與標本中藥物濃度的量呈反比。由于抗體的分子量遠大于藥物的分子量,游離的熒光標記藥物與結合抗體的熒光標記藥物所產生的偏振熒光強度相差甚遠。因此在FPIA中測定的偏振熒光強度與標本中藥物的濃度呈反比。
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