2012初級檢驗技師基礎知識:腦脊液細胞計數與分類計數
1.檢測原理
(1)清亮或微渾的腦脊液標本,可以直接計數細胞總數,或稀釋后再直接計數,將結果乘以稀釋倍數。
(2)可采用直接計數法計數白細胞,或稀釋后再直接計數,將結果乘以稀釋倍數。
(3)白細胞直接計數后,在高倍鏡下根據白細胞形態特征進行分類計數。也可采用Wright染色后,油鏡下分類計數。
2.方法學評價
細胞總數計數和分類計數常用顯微鏡計數法。白細胞直接分類法簡單、快速,但準確性差,尤其是陳舊性標本,細胞變形,分類困難,誤差較大。涂片染色分類法細胞分類詳細,結果準確可靠,尤其是可以發現異常細胞如腫瘤細胞,故推薦使用此法。該法不足之處是操作較復雜,費時。
腦脊液細胞收集有幾種方法,離心涂片法常影響細胞形態及分類。目前,玻片離心沉淀法和細胞室沉淀法已用于腦脊液細胞的濃縮和收集,其優點是收集的細胞形態完整(尤其是細胞室沉淀法),分類效果好。另外,玻片離心沉淀法陽性率高。
血細胞分析儀進行腦脊液計數和白細胞分類,此法簡單、快速,可以自動化。但病理性、陳舊性標本中的組織、細胞的碎片和殘骸以及細胞變形等都可以影響細胞分類和計數,故重復性、可靠性有待進一步探討。另外,蛋白質含量高,尤其有凝塊的腦脊液標本容易使儀器發生堵孔現象,故不推薦使用。
3.質量控制
(1)細胞計數:①標本采集后應在1h內進行細胞計數。標本放置過久,細胞可能凝集成團或被破壞,影響計數結果。②標本必須混勻后方可進行檢查,否則會影響計數結果。
(2)校正與鑒別:①因穿刺損傷血管,引起血性腦脊液,白細胞計數結果必須校正,以消除因出血帶來的白細胞。②細胞計數時,應注意紅細胞、白細胞與新生隱球菌的鑒別。新生隱球菌不溶于乙酸,加優質墨汁后可見未染色的莢膜;白細胞也不溶于乙酸,加酸后細胞核和細胞質更加明顯;紅細胞加酸后溶解。
(3)檢查方法:白細胞直接計數法的試管與吸管中的冰乙酸要盡量去盡,否則可使結果偏低。若標本陳舊、細胞變形時,白細胞直接分類法誤差大,可采用涂片染色分類法分類計數。
(4)染色固定:涂片染色分類計數時,離心速度不能太快,否則會影響細胞形態,可采用玻片離心法、沉淀室法收集細胞。涂片固定時間不能太長,更不能高溫固定,以免使細胞皺縮,影響檢驗結果。
4.參考值
(1)無紅細胞。
(2)白細胞極少,成人:(0~8)×106/L,兒童:(1~15)×106/L,主要為單個核細胞,淋巴細胞與單核細胞之比為7:3.
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