初級檢驗技師輔導：化學發(fā)光自動化免疫分析
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初級檢驗技師輔導：化學發(fā)光自動化免疫分析 $lesson$
化學發(fā)光自動化免疫分析
(1)原理：是將發(fā)光系統(tǒng)與免疫反應(yīng)相結(jié)合，以檢測抗原或抗體的方法。其既具有免疫反應(yīng)的特異性，更兼有發(fā)光反應(yīng)的高敏感性。發(fā)光可分為三種類型：光照發(fā)光、生物發(fā)光和化學發(fā)光。
(2)化學發(fā)光免疫分析中的標記物質(zhì)及類型
①發(fā)光免疫分析反應(yīng)中直接參與發(fā)光反應(yīng)的標記物;
②以催化作用或能量傳遞參與發(fā)光反應(yīng)的酶標記物;有辣根過氧化物酶(HRP) 和堿性磷酸酶(ALP)。
③以能量傳遞參與氧化反應(yīng)的非酶標記物。最常用的有三聯(lián)吡啶釕標記物。
例題：化學發(fā)光免疫分析中以催化作用參與發(fā)光反應(yīng)最常用的酶標記物：
A.HRP B.THB C.TMB D.OPD E.ALP
答案：AE
(3)化學發(fā)光免疫分析的類型：
①化學發(fā)光酶免疫測定(CLEIA)：是采用化學發(fā)光劑作為酶反應(yīng)底物的酶標記免疫測定。以過氧化物酶為標記酶、以魯米諾為發(fā)光底物、并加入發(fā)光增強劑以提高敏感度和發(fā)光穩(wěn)定性。應(yīng)用的標記酶也可以為堿性磷酸酶，固相載體為磁性微粒。
②化學發(fā)光免疫測定(CLIA)：是用化學發(fā)光劑直接標記抗原或抗體的一類免疫測定方法。吖啶酯是較為理想的發(fā)光底物。魯米諾類和吖啶酯類發(fā)光劑等均是常用的標記發(fā)光劑。
③微粒子化學發(fā)光免疫分析：有兩種方法：一是小分子抗原物質(zhì)的測定采用競爭法;二是大分子的抗原物質(zhì)測定采用雙抗體夾心法。
④電化學發(fā)光免疫測定(ECLI)：是一種在電極表面由電化學引發(fā)的特異性發(fā)光反應(yīng)，包括電化學和化學發(fā)光兩個部分。
(4)臨床應(yīng)用優(yōu)越性①敏感度高，甚至超過RIA;②精密度和準確性好，可與RIA相比;③試劑穩(wěn)定無毒害;④測定耗時短;⑤測定項目多;⑥已發(fā)展成自動化測定系統(tǒng)，因此在醫(yī)學檢驗中可取代RIA。