初級檢驗技士考試輔導：微生物學檢查 $lesson$

　　微生物學檢查

　　1、標本采集：根據不同疾病采集不同標本，血液、尿液、糞便及食物。腸熱癥的第1、2周取血液，第2、3周取糞便與尿液。整個病程中骨髓分離細菌陽性率較高。食物中毒采集食物與糞便。

　　2、檢驗方法及鑒定

　　1、直接檢測：商品膠乳凝集試劑，快速檢出沙門菌和志賀菌。

　　2、分離培養：

　　1)糞便：一般將糞便或肛拭直接接種于SS和麥康凱平板上，用兩種培養基的目的是提高標本的陽性檢出率。

　　2)血液和骨髓：抽取患者血液5ml或骨髓0.5ml，立即接種于含0.5%膽鹽肉湯或葡萄糖肉湯5ml試管中進行增菌，48小時將培養物移種到血平板和腸道鑒別培養基上，若有細菌生長取菌涂片革蘭染色并報告結果。對增菌培養物連續培養7天，仍無細菌生長時，則報告陰性。

　　3)尿液：取尿液2-3ml經硫磺酸鹽肉湯增菌后，再接種于腸道菌選擇培養基或血平板上進行分離培養，亦可將尿液離心沉淀物分離培養。

　　4)局部感染的膿液。

　　3、鑒定：沙門菌屬的鑒定與志賀菌屬相同，須根據生化反應和血清學鑒定兩方面進行。

　　(1)初步鑒定：如為革蘭陰性桿菌時作氧化酶試驗，陰性時，挑取可疑菌落分別接種于KIA和MIU上，并作生化反應。以沙門菌多價診斷血清作玻片凝集試驗。

　　凡符合KIA：K/A、產氣+/-、H2S+/-、MIU：動力+、吲哚-、脲酶+、氧化酶-，觸酶+，硝酸鹽還原+，以沙門菌多價血清作玻片凝集試驗陽性，鑒定為沙門菌屬。

　　(2)最后鑒定：沙門菌血清學鑒定主要借助于沙門菌O抗原多價血清與O、H、Vi抗原的單價因子血清。甲型副傷寒沙門菌、鼠傷寒沙門菌和傷寒沙門菌分別屬于A、B、D血清型。

　　(3)血清學診斷：肥達試驗：用已知的傷寒沙門菌O、H抗原，副傷寒沙門菌甲、乙H抗原稀釋后，與被檢血清作定量凝集試驗，以檢測患者血清中抗體的含量，來判斷機體是否受沙門菌感染而導致腸熱癥，并判斷沙門菌的種類。

　　菌體抗原(O抗原)――顆粒狀凝集

　　鞭毛抗原(H抗原)――絮狀凝集

　　一般傷寒O>1:80;H>1:160有臨床意義;

　　副傷寒A、B、C>1:80有臨床意義

　　若第二次效價比第一次高4倍以上具有診斷價值。

　　O抗原為IgM，出現早，持續存在時間較短。

　　H抗原為IgG出現較遲，持續存在時間較長。

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