初級檢驗技士:腦膜炎奈瑟菌微生物學檢驗
更新時間:2010-12-10 11:18:02
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初級檢驗技士:腦膜炎奈瑟菌微生物學檢驗
微生物學檢驗
(1)標本采集:菌血癥期時采血液;出現出血點或瘀斑者采取瘀斑滲出液;出現腦膜刺激癥時可抽腦脊液;上呼吸道感染期的和帶菌者可取鼻咽分泌物。
注意:該菌能產生自溶酶,易自溶,故采集時標本不宜放冰箱,應保溫立即送檢。必要時可作雙份血清測定抗體效價的變化。
(2)檢驗方法及鑒定:
1)直接涂片檢查:
①瘀血斑:刺破瘀斑血印片,或血膜片,干燥固定后革蘭染色陰性雙球菌,呈腎形成對排列,可初診。
②腦脊液:取腦脊液離心后沉淀物涂片,干燥固定后革蘭染色,若發現中性粒細胞內或胞外革蘭陰性雙球菌,呈腎形成對排列,結合臨床可確診。
2)分離培養:將標本葡萄糖肉湯增菌培養液,直接接終于血瓊脂平板、巧克力瓊脂平板,置于5%-10%CO2環境中,35℃培養18-24小時后可見圓形、灰褐色、濕潤、光滑、邊緣整齊、直徑1-2mm的小菌落,經涂片證實為革蘭陰性雙球菌,并進一步根據相應的生化反應等試驗予以鑒定。
3)鑒定:該菌鑒定主要通過氧化酶、糖類發酵和血清學等試驗以及培養生長特點進行。
①細菌染色形態;
②氧化酶試驗陽性;
③觸酶試驗陽性;
④分解葡萄糖、麥芽糖產酸不產氣;
⑤莢膜多糖抗原直接凝集試驗。
(3)結果評價和報告
重視腦脊液和瘀點穿刺物的直接鏡檢,這是最快速確證腦膜炎奈瑟菌的簡便方法。
直接鏡檢為革蘭染色陰性雙球菌,可初報,經分離培養后見菌落特征典型、生化反應能力弱,只分解葡萄糖、麥芽糖、產生少量酸,氧化酶試驗陽性,可報“檢出腦膜炎耐瑟菌”。快速乳膠凝集試驗陽性。
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