初級檢驗技師考試輔導：抗血清的制備
更新時間：2010-11-11 09:30:35
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初級檢驗技師考試輔導：抗血清的制備
抗血清的制備
(1)免疫動物的選擇：
①抗原與免疫動物的種屬差異越遠越好。
②動物必須適齡、健壯、無感染、體重合乎要求。
③針對不同性質的免疫原，選用相應的動物。甾類激素多用家兔;酶類多用豚鼠。
④抗血清要求為R(rabbit)型或H(horse)型血清。
此外需要制備大量免疫血清時，應選用馬、綿羊等大動物;若需要量不多，則選用家兔、豚鼠和雞等。
(2)免疫方法及途徑
①免疫原的注射劑量：應考慮抗原性強弱、分子量大小、動物的個體狀態和免疫時間。
②免疫途徑：通常有靜脈、腹腔、肌肉、皮內、皮下、淋巴結及足掌等。
③免疫方案：根據設計的目的要求、抗原性質、佐劑的種類來制定免疫方案。可采用全量免疫法、微量免疫法或混合免疫法。
④抗體產生階段：可分靜止期(約2天，血中尚無抗體);指數期(約4天左右，抗體迅速上升);穩定期(約2～4周，抗體保持一個穩定水平);下降期(約幾個月后，此時抗體緩慢下降)四個階段。
(3)抗血清的鑒定和保存
1)特異性抗體的鑒定：
①抗體特異性鑒定：常采用雙向免疫擴散法。
②抗體的效價的鑒定：常采用雙向免疫擴散法。一是僅稀釋抗血清，與同一濃度抗原反應;另一是抗血清、抗原同時稀釋作棋盤滴定。
③抗體的純度鑒定：常用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法鑒定。
2)抗血清的保存：
①是4℃保存，通常可保存3個月～半年，效價高時可保存一年左右;
②是-20℃～-40℃低溫保存，可保存5年左右，但需防止反復凍融;
③種是真空冰凍干燥保存，可保存5～10年。
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