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臨床助理醫(yī)師考試培訓:蛋白質的沉淀

更新時間:2011-06-15 13:53:33 來源:|0 瀏覽0收藏0

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    臨床助理醫(yī)師考試培訓:蛋白質的沉淀 $lesson$

  概念:蛋白質溶液中析出的現象稱為沉淀。

  常用的方法:

  1)鹽析:在蛋白質溶液中若加大量中性鹽,蛋白質膠粒的水化層即被破壞,其所帶電荷也被中和,蛋白質膠粒因失去這兩種穩(wěn)定因素而沉淀。此種沉淀過程稱為鹽析。常用的中性鹽有硫酸銨、硫酸鈉和氯化鈉等。鹽析沉淀的蛋白質不發(fā)生變性是其優(yōu)點,缺點是沉淀的蛋白質中混有大量中性鹽,必須經透析除去。

  2)重金屬鹽沉淀蛋白質:重金屬離子如Ag十、Hg2+、Cu2十、Pb2十等,可與蛋白質的負離子結合,形成不溶性蛋白質沉淀。沉淀的條件為pH稍大于蛋白質的pI為宜。

  3)生物堿試劑與某些酸沉淀蛋白質:生物堿試劑如苦味酸、鞣酸、鎢酸等以及某些酸,如三氯醋酸、磺酸水楊酸、硝酸等,可與蛋白質的正離子結合成不溶性的鹽沉淀。沉淀的條件是pH?PI。

  4)有機溶劑沉淀蛋白質:可與水混合的有機溶劑,如酒精、甲醇、丙酮等能與蛋白質爭水,破壞蛋白質膠粒的水化膜,使蛋白質沉淀析出。在常溫下,有機溶劑沉淀蛋白質往往引起變性。

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