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大多數病例，根據臨床表現即可作出診斷。如原發性感染多見于嬰幼兒，急性發作,全身反應重，口腔黏膜的任何部位和口唇周圍可出現成簇的小水皰，隨后，口腔黏膜形成糜爛或淺潰瘍，口周皮膚結痂。復發性感染成人多見，全身反應輕，口角、唇紅緣及皮膚出現典型的成簇小水皰。

口腔單純皰疹病毒感染的實驗室診斷只是用于最終確診。常用的方法如下：

1.病毒分離和鑒定取臨床標本水皰液、唾液或病損表面刮取物接種于敏感細胞株進行分離培養，觀察細胞病變效應(CPE),特點是細胞腫脹、變圓，可見融合細胞或多核巨細胞。再利用DNA限制性內切酶圖譜分析以及HSV-1和HSV-2特異性單克隆抗體試驗進一步分型鑒定。

2.直接檢測病毒取皰疹液電子顯微鏡下直接檢測病毒顆粒;應用免疫熒光法或免疫酶技術檢查特異性單純皰疹病毒抗原;應用原位核酸雜交或PCR方法檢測病損組織中的單純皰疹病毒DNA。

3.血清學檢查免疫酶聯免疫吸附試驗(ELISA)和間接免疫熒光、中和試驗(NT)等檢測單純皰疹特異性抗體，此方法適用于抗體普查、流行病學調查等。

鑒別診斷

1.皰疹型復發性阿弗他潰瘍為散在分布的單個小潰瘍，反復發作,沒有發皰史;潰瘍數量較

多,主要分布于口腔內角化程度較差的黏膜處,不造成牙齦紅腫，兒童少見,無皮膚損害

2.三叉神經帶狀皰疹是由水痘-帶狀皰疹病毒引起的顏面皮膚和口腔黏膜的病損。水皰較大,皰疹聚集成簇,沿三叉神經的分支排列成帶狀,不超過中線。疼痛劇烈，甚至損害愈合后在一段時期內仍有疼痛。本病任何年齡都可發生，愈后很少復發。

3.手-足-口病因感染柯薩奇病毒A16等腸道病毒所引起的皮膚黏膜病，但口腔損害比皮膚重。前驅癥狀有發熱、困倦與局部淋巴結腫大;然后在口腔黏膜、手掌、足底出現散在水皰、丘疹與斑疹，數量不等。斑疹周圍有紅暈，無明顯壓痛，中央為小水皰，皮膚的水皰數日后干燥結痂;口腔損害廣泛分布于唇、頰、舌、腭等處，初起時多為小水皰，很快破潰成為糜爛或潰瘍,5～10日后愈合。

4.皰疹性咽峽炎由柯薩奇病毒A4所引起的口腔皰疹損害,臨床表現似原發性皰疹性齦口炎，但前驅期癥狀和全身反應都較輕,病損的分布只限于口腔后部，如軟腭、懸雍垂、扁桃體等處，為聚集成簇的小水皰，不久破潰形成糜爛或潰瘍，損害很少發生于口腔前部，牙齦不受損害，病程大約7天。

5.多形紅斑是累及皮膚和黏膜，以靶形或虹膜狀紅斑為典型皮損的急性炎癥性皮膚黏膜病。誘發因素包括感染、藥物的應用等,但也有些找不到明顯誘因。黏膜充血水腫，有時見紅斑學及水皰。皰很快破潰，故最常見的病變為大面積糜爛。糜爛表面有大量滲出物形成的假膜。病損易出血,在唇部常形成較厚的黑紫色血痂。皮損常對稱分布于手背、足背、前臂損害為紅斑、丘疹、水皰、大皰或血皰等。典型皮損為靶形紅斑，呈圓形或卵圓形,可向圍擴展，中央為暗紫紅色，襯以鮮紅色邊緣。

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